विषय

• उद्देश्य
• सिद्धांत
• सामग्री
• तरीका

माइक्रोबियल संस्कृतियों के साथ अध्ययन में अक्सर उनमें मौजूद जीवों की पहचान की आवश्यकता होती है। जब एक संस्कृति के एक छोटे से हिस्से को एक पोषक माध्यम से युक्त अगर पर पेश किया जाता है, तो बैक्टीरिया के द्रव्यमान को अलग-अलग रंग बनाने वाली इकाइयों में अलग करना संभव है। इनमें से प्रत्येक इकाई असतत उपनिवेशों में विकसित होती है, जो उन विशेषताओं को दर्शाती है जो जीव की पहचान करने में मदद करती हैं।

उद्देश्य

माइक्रोबायोलॉजी अध्ययन के लिए विशेष जीवों के आकारिकी के अध्ययन की आवश्यकता होती है। कुछ मामलों में, एक मिश्रित संस्कृति में मौजूद जीवों को विश्लेषण किए जाने से पहले अलग किया जाना चाहिए। इस प्रकार, इन माइक्रोबियल कालोनियों को अलग करना महत्वपूर्ण है। जीवाणु संस्कृतियों में एक ही बूंद में बड़ी संख्या में कोशिकाएं होती हैं। अगर प्लेट पर घटने से बुवाई उन्हें पतला करती है, जिससे प्लेट के एक विशिष्ट क्षेत्र में एक भी जीवाणु कोशिका जमा हो जाती है। इनमें से कई अलग-अलग कोशिकाओं को बीच में कुछ मिलीमीटर द्वारा अलग किया जाता है। उनमें से प्रत्येक अलग-अलग कालोनियों को जन्म देते हुए, हजारों नई कोशिकाओं को बनाने के लिए विभाजित होता है।

सिद्धांत

अगर प्लेट सूक्ष्मजीवों के विकास और गुणन को प्रोत्साहित करने वाले पोषक तत्वों से भरपूर एक माध्यम प्रदान करती है। सीवेज सीडिंग, क्वाड्रंट स्ट्राइक विधि का उपयोग करता है, जिसमें पूरी प्लेट को चार क्वाड्रंट में विभाजित किया जाता है। जैसा कि आप एक चतुर्थांश से दूसरे स्थान पर जाते हैं, पूरी उपलब्ध सतह पर मूल संस्कृति का क्रमिक कमजोर पड़ना है। आप जिस क्वाड्रंट की शुरुआत करते हैं, वह घनीभूत और अविभाजित माइक्रोबियल वृद्धि को दर्शाता है, जो सूक्ष्मजीवों के एक कालीन जैसा दिखता है, जबकि अंतिम एक पृथक कालोनियों को दर्शाता है।

सामग्री

थकावट से बुवाई के लिए पोषक तत्व अगर प्लेट, इनोक्यूलेशन के लिए एक लूप, बैक्टीरिया की संस्कृति, एक कीटाणुनाशक समाधान, जैसे कि लाइसोल 10%, और एक ब्यूसेन बर्नर की आवश्यकता होती है। आपको सुरक्षा उपकरणों की भी आवश्यकता होगी, जैसे कि एप्रन, दस्ताने और छप चश्मे। खिंचाव के निशान के गठन के लिए इनोकुलम बैक्टीरिया की संस्कृति से लूप का उपयोग करके और पोषक तत्व अगर प्लेटों को खरोंच से बनाया जाता है। बन्सन बर्नर खांचे के दौरान हैंडल को ज्वलन के लिए है। प्रयोग शुरू करने से पहले सतह को साफ करने के लिए कीटाणुनाशक समाधान का उपयोग करें।

तरीका

पीछे और आगे की गति के साथ पहले क्वाड्रंट में बोने के लिए इनोकुलम की थोड़ी मात्रा का उपयोग करें। संभाल लौ और यह ठंडा करने के लिए अनुमति देते हैं, यह अगर प्लेट नहीं किया गया है कि अग्र प्लेट का एक हिस्सा को छूने। उस क्षेत्र के एक छोर को स्पर्श करें जिसे आपने अभी बोया था और उसे वहां से दूसरे चतुर्थांश तक खींचकर ले जाएँ। लूप को फिर से लौ और ठंडा करें, और दूसरे क्षेत्र से, तीसरे चतुर्थांश पर काम करें। चौथे क्वाड्रंट के साथ भी यही प्रक्रिया दोहराएं।