विषय

• बेहतर दृश्य
• पहचान और वर्गीकरण
• व्यवहार्यता का पता लगाना
• सेलुलर संरचनाओं की पहचान

सूक्ष्मजीवविज्ञानी सूक्ष्मजीवों की विशेषताओं का अध्ययन करते हैं, जैसे कि शैवाल, बैक्टीरिया, प्रोटोजोआ, कवक और वायरस, एक माइक्रोस्कोप का उपयोग करके। हालांकि कुछ जीवों, जैसे प्रोटोजोआ और खमीर कोशिकाओं को स्लाइड के माध्यम से देखना आसान है, बैक्टीरिया कोशिकाओं को धुंधला होने की आवश्यकता होती है। बैक्टीरिया कोशिकाओं और कोशिका संरचनाओं के दृश्य में सुधार के लिए वैज्ञानिकों ने कई तरीके विकसित किए हैं, जैसे कि ग्राम धुंधला तकनीक, एसिड-फास्ट धुंधला और फ्लोरोसेंट धुंधला। ऐसे धुंधला तरीकों का उपयोग करके, उन संरचनात्मक विशेषताओं की पहचान करना संभव है जो बैक्टीरिया को वर्गीकृत करने में मदद करते हैं।

धुंधला तकनीक बैक्टीरिया के दृश्य को बेहतर बनाने में मदद करती है (डंकन स्मिथ / स्टॉकबाइट / गेटी इमेज)

बेहतर दृश्य

जीवाणु जीव इतने छोटे होते हैं कि उनमें से अधिकांश केवल एक खुर्दबीन के नीचे 1000 बार की आवर्धन शक्ति के साथ दिखाई देते हैं। हालांकि, सरल इज़ाफ़ा स्पष्टता की पर्याप्त डिग्री प्रदान नहीं करता है, इसलिए बैक्टीरिया को विज़ुअलाइज़ेशन के लिए आवश्यक स्पष्टता प्रदान करने के लिए अवलोकन से पहले रंगीन होना चाहिए।

पहचान और वर्गीकरण

बैक्टीरिया के प्रकारों के बीच अंतर करने के लिए बैक्टीरिया के अंतर को अंतर धुंधला के रूप में जाना जाता है। ग्राम धुंधला एक अंतर धुंधला है जो सेल दीवार सामग्री के एक समारोह के रूप में बैक्टीरिया को अलग करता है। इस विधि में, बैक्टीरियल कोशिकाएं वायलेट को मोड़ने के लिए एक क्रिस्टल वायलेट डाई के साथ प्रतिक्रिया करती हैं। एक मलिनकिरण एजेंट को जोड़कर कुछ जीवाणु कोशिकाएं रंग खो देती हैं, जबकि अन्य नहीं। सफ़रिन डाई को शामिल करके, फीकी पड़ चुकी कोशिकाएँ लाल धुंधला हो जाती हैं, जबकि बैक्टीरिया कोशिकाएँ जो रंग नहीं खोती हैं, बैंगनी बनी रहती हैं। लाल कोशिकाओं को ग्राम-नकारात्मक जीव कहा जाता है और जो लाल नहीं होते हैं उन्हें ग्राम-सकारात्मक जीव के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। ग्राम धुंधला तकनीक संक्रमणों में शामिल बैक्टीरिया की प्रारंभिक पहचान के लिए एक तेज़ तरीका प्रदान करता है। इसी तरह, एसिड-प्रतिरोधी धुंधला हो जाना विशेष रूप से माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस जैसे माइकोबैक्टीरिया नामक बैक्टीरिया के वर्ग से संबंधित जीवों की पहचान करने में मदद करता है।

व्यवहार्यता का पता लगाना

बैक्टीरिया की संस्कृति के नमूनों में, जीवित बैक्टीरिया कोशिकाओं की उपस्थिति का पता लगाना अक्सर महत्वपूर्ण होता है। फ्लोरोसेंट धुंधला जैसे तरीके यह पहचानने में मदद करते हैं कि संस्कृति कोशिकाएं व्यवहार्य हैं या नहीं। लाइव बैक्टीरिया में टेट्राजोलियम क्लोराइड 5-साइनो-2,3-डिटोलिल (सीटीसी) को एक डाई में बदलने की क्षमता है जो एक लाल प्रतिदीप्ति दिखाता है। इसलिए, जब सीटीसी-रंग की संस्कृतियां इन फ्लोरोसेंस का उत्सर्जन करती हैं, तो यह व्यवहार्य बैक्टीरिया की उपस्थिति को इंगित करता है। प्रोपीडियम आयोडाइड एक धुंधला है जो केवल जीवित कोशिकाओं पर कार्य करता है जो झिल्ली को नुकसान पहुंचाते हैं और इसलिए मृत बैक्टीरिया कोशिकाओं की पहचान करने में उपयोगी होते हैं।

सेलुलर संरचनाओं की पहचान

रंग विभिन्न सेल संरचनाओं के लिए एक स्पष्ट दृश्य विधि प्रदान करता है। उदाहरण के लिए, Feulgen धुंधला विधि जीवाणु कोशिकाओं के अंदर नाभिक की पहचान करने की अनुमति देता है, जबकि अल्बर्ट धुंधला metachromatic कणिकाओं के दृश्य में उपयोगी है। इसी तरह, चांदी संसेचन तकनीक स्पिरोकैट्स की पहचान करने की अनुमति देती है। फ्लैगेल्ला यह देखना आसान है कि वे रियू के रंग के साथ कब रंग रहे हैं। मैलाकाइट ग्रीन धुंधला बैक्टीरिया के बीजाणुओं की पहचान करने में मदद करता है।