विषय

• बेहतर देखने वाला
• पहचान और वर्गीकरण
• व्यवहार्यता का पता लगाना
• सेलुलर संरचनाओं की पहचान

सूक्ष्मजीवविज्ञानी सूक्ष्मजीवों की विशेषताओं का अध्ययन करते हैं, जैसे कि शैवाल, बैक्टीरिया, प्रोटोजोआ, कवक और वायरस, एक माइक्रोस्कोप का उपयोग करके। हालांकि कुछ जीवों, जैसे प्रोटोजोआ और खमीर कोशिकाओं को स्लाइड के माध्यम से देखना आसान है, बैक्टीरिया कोशिकाओं को धुंधला होने की आवश्यकता होती है। वैज्ञानिकों ने बैक्टीरिया कोशिकाओं और सेल संरचनाओं के दृश्य में सुधार के लिए कई तरीके विकसित किए हैं, जैसे कि ग्राम धुंधला तकनीक, एसिड-प्रतिरोधी धुंधला और फ्लोरोसेंट धुंधला। ऐसे धुंधला तरीकों का उपयोग करके, उन संरचनात्मक विशेषताओं की पहचान करना संभव है जो बैक्टीरिया को वर्गीकृत करने में मदद करते हैं।

बेहतर देखने वाला

जीवाणु जीव इतने छोटे होते हैं कि उनमें से अधिकांश केवल माइक्रोस्कोप के नीचे 1000 बार की आवर्धन शक्ति के साथ दिखाई देते हैं। हालांकि, आकार में साधारण वृद्धि स्पष्टता की पर्याप्त डिग्री प्रदान नहीं करती है, इसलिए दृश्यता के लिए आवश्यक स्पष्टता प्रदान करने के लिए अवलोकन से पहले बैक्टीरिया को रंगीन होना चाहिए।

पहचान और वर्गीकरण

बैक्टीरिया को बैक्टीरिया के बीच भेद करने के लिए धुंधला हो जाना अंतर धुंधला के रूप में जाना जाता है। ग्राम दाग एक अंतर दाग है जो सेल दीवार सामग्री के आधार पर बैक्टीरिया को अलग करता है। इस विधि में, बैक्टीरियल कोशिकाएं वायलेट को मोड़ने के लिए एक क्रिस्टल वायलेट डाई के साथ प्रतिक्रिया करती हैं। एक विरंजन एजेंट के अलावा के माध्यम से, कुछ बैक्टीरिया कोशिका अपना रंग खो देते हैं, जबकि अन्य नहीं करते हैं। सफ़रिन डाई के अलावा, फीकी पड़ चुकी कोशिकाएँ लाल हो जाती हैं, जबकि बैक्टीरिया की कोशिकाएँ जो रंग नहीं खोती हैं, बैंगनी बनी रहती हैं। लाल होने वाली कोशिकाओं को ग्राम-नकारात्मक जीव कहा जाता है और लाल नहीं होने वाली कोशिकाओं को ग्राम-सकारात्मक जीव के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। ग्राम धुंधला तकनीक संक्रमणों में शामिल बैक्टीरिया की प्रारंभिक पहचान के लिए एक त्वरित तरीका प्रदान करता है। इसी तरह, एसिड-प्रतिरोधी धुंधला हो जाना विशेष रूप से माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस जैसे माइकोबैक्टीरिया नामक बैक्टीरिया के वर्ग से संबंधित जीवों की पहचान करने में मदद करता है।

व्यवहार्यता का पता लगाना

बैक्टीरिया संस्कृतियों के नमूनों में, जीवित बैक्टीरिया कोशिकाओं की उपस्थिति का पता लगाना अक्सर महत्वपूर्ण होता है। फ्लोरोसेंट स्टेंसिंग जैसे तरीके यह पहचानने में मदद करते हैं कि संस्कारी कोशिकाएँ व्यवहार्य हैं या नहीं। लाइव बैक्टीरिया में टेट्राजोलियम 5-साइनो-2,3-डिटोलिल क्लोराइड (सीटीसी) को एक डाई में बदलने की क्षमता है जो एक लाल प्रतिदीप्ति दिखाता है। इसलिए, जब सीटीसी-रंग की संस्कृतियां इन फ्लोरोसेंस का उत्सर्जन करती हैं, तो यह व्यवहार्य बैक्टीरिया की उपस्थिति को इंगित करता है। प्रोपीडियम आयोडाइड एक ऐसा दाग है जो केवल गैर-जीवित कोशिकाओं पर कार्य करता है जो झिल्ली को नुकसान पहुंचाते हैं और इसलिए मृत बैक्टीरिया कोशिकाओं की पहचान करने में उपयोगी होते हैं।

सेलुलर संरचनाओं की पहचान

धुंधला हो जाना विभिन्न कोशिका संरचनाओं के स्पष्ट दृश्य की एक विधि प्रदान करता है। उदाहरण के लिए, Feulgen धुंधला विधि जीवाणु कोशिकाओं के भीतर नाभिक की पहचान की अनुमति देता है, जबकि अल्बर्ट धुंधला metachromatic कणिकाओं को देखने में उपयोगी है। इसी तरह, चांदी संसेचन तकनीक स्पिरोकैट्स की पहचान करने की अनुमति देती है। जब वे Ryu के रंग से रंगे हों तो फ्लैगेल्ला का निरीक्षण करना आसान होता है। मैलाकाइट ग्रीन धुंधला बैक्टीरिया के बीजाणुओं की पहचान करने में मदद करता है।